By this author

Development of an in vitro model of dysferlinopathy via crispr/cas-mediated transcriptional activation of the dysf gene

Issue number 4 from 15.07.2024

Для разработки методов генной терапии и геномного редактирования при моногенных заболеваниях необходимы клеточные модели из тканей человека, полученных малоинвазивными методами, позволяющие провести скрининг и выбрать наиболее эффективный подход по восстановлению синтеза целевого белка. В работе применена система транскрипционной активации CRISPR/dCas9-SAM, обеспечивающая экспрессию гена DYSF в клетках линии HEK 293Т, а также в фибробластах десны пациента с дисферлинопатией (с гомозиготной мутацией c. 2779delG (Ala9 27LeufsX 2 1)). После активации гена DYSF удалось детектировать его функциональные продукты (мРНК гена и белок) в транскрипционно активированных (ТА) клетках HEK293Т (HEK293Т_ТА) и мРНК в фибробластах. Активация транскрипции интересующего гена в фибробластах и клеточной линии HEK 293Т_ТА может быть использована для in vitro оценки эффективности геномного редактирования и генной терапии дисферлинопатии. Активируя ген, участвующий в развитии той или иной патологии, можно впоследствии использовать системы редактирования генома, а также конструкции для генной терапии. Это позволит более точно изучать вклад различных мутаций в патогенез заболевания и разрабатывать этиотропное лечение.

56 0