By this author

Design and selection of guides for CRISPR/Cas9-mediated knockout of the <i>Kcnv</i>2 gene in mouse cells

Issue number 5-6 from 15.11.2024

Мутации в гене KCNV2 человека вызывают редкое наследственное заболевание сетчатки — дистрофию колбочек с повышенной активностью палочек (CDSRR), которая характеризуется прогрессирующей потерей зрения и нарушением цветоразличения. Ген KCNV2 кодирует субъединицу калиевого канала Kv8.2, играющую важную роль в нормальной работе фоторецепторов сетчатки. Поскольку в настоящее время этиотропной терапии для CDSRR не существует, генотерапия представляется перспективным методом лечения. Для проверки эффективности генотерапевтических подходов необходимо создание адекватной экспериментальной модели — нокаутной мышиной линии по гену Kcnv2. В нашем исследовании мы сосредоточились на подборе оптимальных гидовых РНК для нокаута данного гена с использованием системы CRISPR/Cas9 и их проверке на мышиной клеточной линии. Результаты экспериментов показали успешное создание одной маленькой 40 нуклеотидов (нт)) и нескольких больших делеций (1100–1400 нт) в гене Kcnv2. Эти данные подтверждают эффективность выбранных гидов и создают основу для разработки нокаутной мышиной модели, которая позволит изучать патофизиологию заболевания и провести тестирование потенциальных терапевтических методов.

7 0